【团体标准】 兽药制剂用清解合剂提取物

1性状取样品适量，于烧杯中，在自然光下观察其色泽。淄博维希尔生物技术有限公司和济南百鸣生物制药有限公司各生产了2批次，观察结果见表3。表2性状结果汇总表批数生产企业批号性状1淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS001红棕色粘稠液体2淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS002棕褐色粘稠液体3淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS003棕褐色粘稠液体4济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS001红棕色粘稠液体5济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS002红棕色粘稠液体6济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS003棕褐色粘稠液体经对6批次进行外观性状检查，确定该提取物的形状为：红棕色至棕褐色粘稠液体。2绿原酸鉴别按照《中华人民共和国兽药典》二部清解合剂【鉴别】（1），清解合剂【鉴别】（1）项中取样量为10mL，相当于中间体兽药制剂用清解合剂提取物5g，取样量按5g±0.5g。其它按照清解合剂【鉴别】（1）检测。淄博维希尔生物技术有限公司生产了3批次；依照上述方法对3批产品的绿原酸进行鉴别，结果均显示在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，结果见图1，鉴别结果汇总表见表3。图1绿原酸鉴别结果汇总图（A-1、A-2、B-1、B-2、C-1、C-2,绿原酸对照品；A-3、A-4,批号WTBQJXS001；B-3、B-4，批号WTBQJXS002；C-3、C-4，批号WTBQJXS003）表3绿原酸鉴别结果汇总表批数生产企业批号鉴别结果1淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS001薄层色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点2淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS002薄层色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点3淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS003薄层色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点由此确定取样量为5g±0.5g，其他按《中华人民共和国兽药典》二部清解合剂【鉴别】（1）方法，适用于兽药制剂用清解合剂提取物的绿原酸的鉴别。3栀子苷鉴别按照《中华人民共和国兽药典》二部清解合剂【鉴别】（2），清解合剂【鉴别】（2）项中取样量为10mL，相当于中间体兽药制剂用清解合剂提取物5g，取样量按5g±0.5g。其它按照清解合剂【鉴别】（2）检测。淄博维希尔生物技术有限公司生产了3批次；依照上述方法对3批产品的栀子苷进行鉴别，均显示在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见图2，鉴别结果汇总表见表4。图2栀子苷鉴别结果汇总图（A-1、A-2、B-1、B-2、C-1、C-2,栀子苷对照品；A-3、A-4,批号WTBQJXS001；B-3、B-4，批号WTBQJXS002；C-3、C-4，批号WTBQJXS003）表4栀子苷鉴别结果汇总表批数生产企业批号鉴别结果1淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS001薄层色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点2淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS002薄层色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点3淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS003薄层色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点由此确定取样量按5g±0.5g，其他按《中华人民共和国兽药典》二部清解合剂【鉴别】（2）方法，适用于兽药制剂用清解合剂提取物的栀子苷的鉴别。4相对密度按照《中华人民共和国兽药典》二部附录的规定检测。淄博维希尔生物技术有限公司和济南百鸣生物制药有限公司各生产了3批次，结果见表5。表5相对密度结果汇总表批数生产企业批号相对密度平均值RSD%（n=4）1淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0011.181.191.180.691.181.172淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0021.191.201.200.801.211.193淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0031.201.211.210.671.221.214济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0011.191.201.200.681.201.215济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0021.201.201.190.971.181.186济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0031.201.201.210.791.221.21RSD%（n=24）1.116批次的相对密度范围在1.18~1.21之间，批内相对标准偏差＜1%，批间相对标准偏差＜2%；考虑实验间的检测误差，且相对密度浓缩到1.25以上时，流动性差，难以从浓缩罐中转移，因此确定相对密度技术指标范围为1.15~1.25。5pH按照《中华人民共和国兽药典》二部附录的规定对pH进行检测。淄博维希尔生物技术有限公司和济南百鸣生物制药有限公司各生产了3批次，结果见表6。表6pH结果汇总表批数生产企业批号pH平均值RSD%（n=4）1淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0015.55.45.51.485.65.52淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0025.35.45.41.785.55.33淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0035.55.55.51.765.45.34济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0015.55.65.61.465.65.75济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0025.55.55.50.915.55.46济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0035.45.55.51.485.55.6RSD%（n=24）1.866批次的检验结果pH范围在5.4~5.6之间，批内相对标准偏差＜2%，批间相对标准偏差＜2%；考虑不同的生产企业，和实验室间的检验误差，确定产品pH技术指标范围为4.5~6.5。6黄芩苷含量按照《中华人民共和国兽药典》二部清解合剂【含量测定】，清解合剂【含量测定】中取样量为2mL，置100mL量瓶中，相当于中间体兽药制剂用清解合剂提取物1g置50mL量瓶中，确定兽药制剂用清解合剂提取取样量为1g，置50mL量瓶中。其它按照清解合剂【含量测定】检测。经淄博维希尔生物技术有限公司和济南百鸣生物制药有限公司各生产了3批次，检验结果见表7。表7黄芩苷含量结果汇总表批数生产企业批号黄芩苷含量（mg/g）平均值RSD%（n=4）1淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0012.372.392.360.882.342.362淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0022.332.302.320.792.342.313淄博维希尔生物技术有限公司WTBQJXS0032.332.342.330.352.322.334济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0012.332.372.361.092.352.395济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0022.362.402.380.722.372.38表7（续）6济南百鸣生物制药有限公司BTBQJXS0032.332.312.310.612.302.30RSD%（n=24）1.296批次检验结果每1g提取物中含黄芩按黄芩苷(C21H18O11)计均＞2.3mg，批内相对标准偏差＜2%，批间相对标准偏差＜2%；考虑不同的生产企业和实验室间的误差，确定该产品黄芩苷含量1g提取物中含黄芩按黄芩苷(C21H18O11)计，≥2.2mg。7黄芩苷含量方法验证本标准黄芩苷含量方法参照并引用了《中华人民共和国兽药典》二部清解合剂。因此参照《中华人民共和国兽药典》二部附录中兽药质量标准分析方法验证指导原则进行分析方法验证，证实此方法适用兽药制剂用清解合剂提取物的相应检测要求。7.1准确度在规定范围内，分别制备3份不同浓度的黄芩苷供试品溶液进行测定，高、中、低浓度对照品加入量与所取供试品中待测成分里量之比控制在1.2:1、1:1、0.8:1，每种浓度分别制备3份，用9份样品的测定结果进行评价。检测结果见表8。表8清解合剂提取物准确度实验结果准确度供试溶液本底值（mg）加入量（mg）测得量（mg）回收率（%）RSD（%）80%（0.576mg/mL）10.620.4961.11599.80.820.620.4961.11299.230.620.4961.11499.6100%（0.720mg/mL）10.620.6621.28099.720.620.6621.27899.430.620.6621.27498.8120%（0.864mg/mL）10.620.7441.35598.820.620.7441.36299.730.620.7441.36099.5平均回收率99.6%，回收率RSD＜2%，证明此方法准确度良好。7.2精密度7.2.1重复性在规定的测试条件下，同一份均匀供试品，经同一分析人员使用同一分析，设备6次取样测定所得结果见表9。表9清解合剂提取物重复性实验结果样品123456含量mg/g1.2751.2791.2741.2761.2731.280平均含量mg/g1.28RSD%0.5由上表可见相对标准偏差RSD＜1.0%。无显著差异，证明方法重复性良好。7.2.2重现性在规定的测试条件下，同一供试样品在不同实验室由不同分析人员测定之间的精密度结果见表10。表10清解合剂提取物重现性实验结果样品123456含量mg/g1.2741.2801.2791.2741.2761.273平均含量mg/g1.27RSD%0.4相对标准偏差RSD＜1.0%。无显著差异，证明方法重现性良好。7.2.3专属性在规定的测试条件下，取溶剂、对照品溶液、供试品溶液分别进样检测，溶剂峰不干扰黄芩苷峰的检测，结果见表11。表11清解合剂提取物专属性实验结果溶液名称溶剂对照品溶液供试品溶液黄芩苷保留时间（min）——11.61211.114结果供试品溶液黄芩苷峰保留时间与对照品溶液黄芩苷峰保留时间一致，证明方法专属性良好。7.2.4线性与范围在规定范围内，分别制备5份不同浓度的黄芩苷对照品溶液进行测定，以测得的响应值对被测物的浓度进行作图，线性关系见表12。表12清解合剂提取物线性实验结果溶液名称浓度（μg/mL）峰面积1峰面积2峰面积平均值线性溶液116.01011.41012.61012.0线性溶液218.01122.51124.31123.4线性溶液320.01226.71227.71227.2线性溶液422.01330.41331.51331.0线性溶液524.01433.91432.81433.4线性方程y=50.955x+0.67相关系数R20.9994线性图由上表看出在测试浓度的80%~120%范围内，黄芩苷浓度与峰面积线性关系良好。8贮存和有效期8.1贮存本品处方与《中华人民共和国兽药典》二部清解合剂完全相同，参照兽药典膏剂冷藏规定确定该产品贮存条件为：冷藏贮存，不得与有毒、有害、有腐蚀性和含有异味的物品混放。9.2有效期考虑不同的生产企业，其生产工艺及生产设备等有所不同，对产品的有效期的规定时间也不尽相同，所以规定有效期为：在符合运输、贮存条件的情况下，原包装产品的有效期与标签标识一致，即有效期由生产企业根据情况，自行确定。