【团体标准】 花椒香气组分含量的测定-气相色谱质谱法

3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1花椒制品花椒经粉碎、萃取、冷冻等工艺生产的产品。主要包括花椒粉、花椒油、保鲜花椒、花椒油树脂等以花椒为原料加工的产品。3.2花椒挥发性组分花椒香味物质的主要成分，含有芳樟醇、柠檬烯、α-侧柏烯、1R-α-蒎烯、桧烯、β一月桂烯等70多种挥发性成分。4原理试样中的挥发性成分经水蒸气蒸馏提取后，通过气相色谱柱分离，质谱检测器检测定性，采用归一化法对挥发性香味物质组分相对含量进行测定。5试剂材料与仪器设备5.1试剂材料5.1.1甲醇：色谱纯。5.1.2水：纯净水。5.1.3无水硫酸钠，分析纯。5.1.4微孔滤膜：孔径0.2um有机相滤膜。5.2仪器设备5.2.1气相色谱-三重四级杆质谱联用仪：GCMS-TQ8050日本SHIMADZU公司。5.2.2色谱柱：安捷伦DB-624柱（1.80μm×30m×0.320mm）。5.2.3挥发油提取器：5ml测量级，精度0.05ml。5.2.4分析天平：感量0.0001g。5.2.5高速粉碎机：转速≥10000rpm。5.2.6高速离心机：≥4500rpm。6仪器参考条件6.1GC-MS色谱条件采用安捷伦DB-624（1.80μm×30m×0.320mm）中等极性毛细管柱，色谱条件如下。6.2GC-MS质谱条件采用SHIMADZULC-MS8050系统对色谱分离得到的物质进行识别和确认。所有数据采集和处理步骤均采用Labsolution工作站进行。7实验步骤7.1样品制备7.1.1干花椒按照GB/T12729.2抽取样品后，去除样品所含的花椒籽、杂物后，按照GB/T12729.3制成粉末样品备用。7.1.2鲜花椒取混合均匀的鲜花椒粒200g，经组织捣碎机捣碎后，备用。7.1.3花椒粉按照GB/T12729.2抽样后，混合均匀备用。花椒油7.2挥发性成分提取按花椒、花椒粉样品25.0g，鲜花椒样品50.0g，花椒油树脂10.0g的取样量进行取样，加入到挥发油提取器中，加入蒸馏瓶容积2/3的蒸馏水，将蒸馏速率调节在2-3mL/min范围内，持续蒸馏4h，停止加热并冷却10min后，收集挥发性成分，并加入2g无水硫酸钠脱水，经0.20μm微孔滤膜过滤，待测。7.3样品测定分别精密吸取挥发油10mg，加入10mL容量瓶，用分析纯甲醇溶液稀释至刻度线，得到浓度约1mg/mL的花椒挥发油甲醇溶液。将待测试样1μL,注入气相色谱—质谱连用仪中，设定质谱自动识别信噪比大于100的色谱峰，使用NIST数据库定性。质谱图的相似度≥80%色谱峰，按峰面积归一化法，计算各挥发性风味物质组分的相对含量。样品液的响应值应在仪器测定的线性范围之内，超出线性范围的供试样品液需用甲醇稀释后测定。7.4结果计算试样中某种挥发性香味成分的相对含量Ci以该成分对应的峰面积对所有成分峰面积总和的分数计，数值以%表示.7.5精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。